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高效液相色譜儀的發(fā)展歷史

高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，通過(guò)檢測器時(shí)，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來(lái)。HPLC廣泛應用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。

發(fā)展歷史：

1960年代，由于氣相色譜對高沸點(diǎn)有機物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開(kāi)發(fā)了世界上第一臺高效液相色譜儀，開(kāi)啟了高效液相色譜的時(shí)代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數，以高壓驅動(dòng)流動(dòng)相，使得經(jīng)典液相色譜需要數日乃至數月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內完成。

1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現代實(shí)踐》一書(shū)，標志著(zhù)高效液相色譜法 (HPLC）正式建立。在此后的時(shí)間里，高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測手段，在有機化學(xué)、生物化學(xué)、醫學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)與檢測、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。高效液相色譜同時(shí)還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù)、數據處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。

1960年代前，使用的填充粒大于100μm，提高柱效面臨著(zhù)困境，后來(lái)的研究人員便采用微粒固定相來(lái)突破著(zhù)一瓶頸。