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高效液相色譜儀通常操作使用步驟和使用常見(jiàn)問(wèn)題
更新時(shí)間：2025-01-03
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，通過(guò)檢測器時(shí)，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來(lái)。HPLC廣泛應用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
高效液相色譜儀通常操作使用步驟和使用常見(jiàn)問(wèn)題：
1.開(kāi)機按溶劑輸液泵上的power鍵，待自檢完畢后開(kāi)始進(jìn)行操作。
2.排氣
逆時(shí)針旋轉排氣閥（不可超過(guò)180°）,打開(kāi)排氣閥，按purge鍵排氣泡，在此期間流動(dòng)相連續流出并且無(wú)氣泡；按purge鍵，泵停止，將排液閥旋鈕順時(shí)針?lè )较蛐D到底，關(guān)閉排液閥
3.沖流動(dòng)相
按Pump鍵，泵啟動(dòng)，觀(guān)察屏幕上壓力顯示，壓力上升平穩后，繼續按上述方法升高流速，使流速上升到實(shí)驗需要的流速。
4.進(jìn)樣
打開(kāi)檢測器，調節波長(cháng)為實(shí)驗需要的波長(cháng)；打開(kāi)工作站，查看基線(xiàn)，待基線(xiàn)走平后，進(jìn)樣。
5.使用后維護
6.水或含水甲醇溶液沖洗
6.1 水或含水甲醇溶液沖洗
使用結束后，將流速降到0.1 ml/min，按Pump鍵，泵停止。換下流動(dòng)相，換上已抽濾并超聲過(guò)的純凈水或含水甲醇溶液。按Pump鍵，泵啟動(dòng)，觀(guān)察屏幕上壓力顯示，壓力上升平穩后，繼續按上述方法升高流速。如流動(dòng)相含有無(wú)機鹽，必須保證足夠的沖洗時(shí)間。
6.2甲醇溶液沖洗
換上已抽濾并超聲過(guò)的甲醇溶液，按3.1的操作進(jìn)行封柱處理。
7 關(guān)機
按Pump鍵，關(guān)閉泵；關(guān)閉桌面在線(xiàn)工作站；按Power鍵關(guān)閉LC-10ATvp。
8.注意事項
8.1 不能使用濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亞砜等作為流動(dòng)相。
8.2 流動(dòng)相溶劑選擇H
8.3 流動(dòng)相溶劑必須進(jìn)行脫氣。若不脫氣則在溶劑混合時(shí)或壓力、溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生氣泡，會(huì )引起泵的誤動(dòng)作和生產(chǎn)檢測器信號噪音。
8.4 以硅膠作載體的化學(xué)鍵合填充劑的穩定性受流動(dòng)相pH值的影響，使用時(shí)應詳細閱讀該柱的說(shuō)明書(shū)，在規定的pH值范圍內使用。使用時(shí)，可在泵與進(jìn)樣器之間連接一硅膠柱，以保護分析柱。當使用高PH或含鹽的流動(dòng)相時(shí)，盡可能縮短使用時(shí)間，用后立即沖洗。
8.5 分析結束后，從色譜流路系統，泵、進(jìn)樣器、色譜柱至檢測器流通池，均應充分沖洗，特別是含鹽的流動(dòng)相，更應注意先用水、再用含水甲醇溶液充分沖洗。如發(fā)現嚴重故障，應與廠(chǎng)家聯(lián)系維修。
8.6 請在使用前充分閱讀作業(yè)指導書(shū)，不得擅自拆卸儀器的零部件。
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