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在實(shí)驗室里做高效液相色譜（HPLC）分析，基線(xiàn)穩定是實(shí)驗能順利進(jìn)行的基礎，數據準不準全看它。 基線(xiàn)要么布滿(mǎn)毛刺，噪聲大得讓人頭疼；要么就慢慢往上飄，或者一個(gè)勁兒往下掉。這些問(wèn)題不僅讓數據重復性差，折騰半天結果也沒(méi)法用，依利科技提供實(shí)用的技術(shù)支持，幫著(zhù)解決這些麻煩，為您整理常見(jiàn)基線(xiàn)問(wèn)題處理方式。

?一、基線(xiàn)不穩定的表現?

基線(xiàn)噪聲大是容易發(fā)現的，好好的一條線(xiàn)，突然布滿(mǎn)小毛刺，這樣一來(lái)峰積分就沒(méi)法準確計算，儀器靈敏度也跟著(zhù)下降，那些含量低的組分，很可能就檢測不出來(lái)了。?

基線(xiàn)漂移也很常見(jiàn)，就是基線(xiàn)慢慢上爬或下滑。它帶來(lái)麻煩的是，有時(shí)會(huì )將目標峰部分甚至全部掩蓋住，造成色譜峰面積積分損失，嚴重影響定量準確性，甚至無(wú)法進(jìn)行定量分析。?

還有比如泵運轉時(shí)的脈動(dòng)帶來(lái)的基線(xiàn)周期性波動(dòng)，對低濃度組分峰的檢測影響非常大，容易引起誤判，甚至直接將這樣的小色譜峰忽略掉。?

二、常見(jiàn)原因及解決方案?

1. 流動(dòng)相問(wèn)題?

流動(dòng)相就像儀器的 “血液”，它出問(wèn)題，基線(xiàn)馬上就有反應。流動(dòng)相脫好不徹底，氣泡進(jìn)入檢測器的檢測池，就會(huì )引基線(xiàn)上下跳動(dòng)，因為氣泡在檢測池里會(huì )干擾光的透過(guò)和折射。配制流動(dòng)相的溶劑的純度也要符合要求。如果溶劑純度低，里面的雜質(zhì)隨流動(dòng)相進(jìn)入檢測系統，干擾信號，讓基線(xiàn)變得雜亂。另外，配制好的緩沖鹽溶液放久了，可能會(huì )析出沉淀，pH 值發(fā)生變化，這些都會(huì )導致基線(xiàn)不穩。?

解決流動(dòng)相的問(wèn)題其實(shí)不難。首先脫氣要做好，實(shí)驗室常用超聲處理，條件允許的話(huà)用在線(xiàn)脫氣機更靠譜，能持續去除氣泡。其次，一定要用 HPLC 級溶劑，雜質(zhì)少，能減少干擾。倒溶劑時(shí)要小心，試劑瓶及時(shí)蓋好，避免污染。緩沖鹽流動(dòng)相好現配現用，配好后盡快使用，別放太久，防止析出沉淀或 pH 變化。?

2. 檢測器問(wèn)題?

檢測器是接收信號的關(guān)鍵，它狀態(tài)不好，基線(xiàn)肯定受影響。氘燈、鎢燈用久了會(huì )老化，能量不足，發(fā)出的光不穩定，檢測器接收的信號就會(huì )波動(dòng)，基線(xiàn)自然不穩。流通池也容易出問(wèn)題，里面臟了或者有氣泡沒(méi)排凈，會(huì )影響光的傳播，導致信號異常，基線(xiàn)要么有噪聲，要么就漂移。?

處理檢測器問(wèn)題，先檢查燈的能量。一般氘燈使用壽命在 1000-2000 小時(shí)，快到時(shí)間或者感覺(jué)能量明顯下降，就及時(shí)更換。流通池臟了，用甲醇或稀硝酸超聲清洗，把臟東西和氣泡清理掉，讓它保持潔凈。?

3. 泵或系統問(wèn)題?

泵是推動(dòng)流動(dòng)相的動(dòng)力，它出問(wèn)題，整個(gè)系統都穩不了。泵的密封圈磨損了，可能會(huì )漏液，或者導致壓力波動(dòng)，流動(dòng)相流速不穩定，基線(xiàn)就會(huì )跟著(zhù)晃。單向閥堵塞也很麻煩，會(huì )讓流速忽快忽慢，系統無(wú)法平穩運行，基線(xiàn)肯定不穩定。?

解決泵和系統的問(wèn)題，定期維護是關(guān)鍵。發(fā)現泵密封圈磨損，趕緊更換，這是泵正常工作的基礎。單向閥堵塞了，用異丙醇浸泡 10 分鐘左右，再超聲清洗，通常能清除堵塞物，讓單向閥恢復正常。?

4. 色譜柱問(wèn)題?

色譜柱是分離組分的核心，它狀態(tài)不佳也會(huì )導致基線(xiàn)問(wèn)題。用久了，色譜柱里會(huì )積累污染物，柱效下降，分析時(shí)可能出現異常峰或基線(xiàn)波動(dòng)。另外，柱溫波動(dòng)也有影響，溫度變化會(huì )改變組分在固定相和流動(dòng)相中的分配，影響保留時(shí)間，進(jìn)而導致基線(xiàn)漂移。?

保養色譜柱，要定期沖洗或再生，具體方法參考色譜柱說(shuō)明書(shū)，按步驟去除污染物。同時(shí)，用柱溫箱穩定柱溫，減少溫度波動(dòng)，這樣基線(xiàn)能穩定不少。?

5. 環(huán)境干擾?

外界環(huán)境的干擾也不能忽視。實(shí)驗室電壓不穩，檢測器供電受影響，信號會(huì )波動(dòng)，基線(xiàn)噪聲增大。周?chē)碾姶鸥蓴_也頭疼，像離心機、空調這些設備運行時(shí)產(chǎn)生的電磁信號，可能干擾檢測器，讓基線(xiàn)不穩。?

應對環(huán)境干擾，首先給儀器接穩壓電源，保證供電穩定。其次，放置儀器時(shí)遠離電磁干擾源，同時(shí)做好儀器接地，減少電磁干擾的影響。?

三、日常維護建議（預防措施）?

做好日常維護，能大大減少基線(xiàn)不穩的問(wèn)題。?

流動(dòng)相管理上，堅持用 HPLC 級溶劑，避免因純度問(wèn)題引入干擾。每次使用前，脫氣處理要到位，不管是超聲還是在線(xiàn)脫氣，都要保證效果。?

檢測器維護很關(guān)鍵，記錄好氘燈使用時(shí)間，快到使用壽命時(shí)提前準備更換，別等能量不足影響實(shí)驗。流通池也要定期清洗，保持潔凈，確保檢測信號準確。?

系統穩定性檢查不能少，定期校準泵的流速，保證流動(dòng)相輸送穩定。經(jīng)常檢查管路是否漏液，發(fā)現問(wèn)題及時(shí)處理，避免影響系統壓力和流速。?

色譜柱保養也重要，使用保護柱能減少污染物進(jìn)入分析柱，延長(cháng)其使用壽命。色譜柱長(cháng)期不用時(shí)，用純有機相妥善保存，防止填料變質(zhì)。?